Aneuploidijas skrīnings lieto, lai noteiktu skaitliskās hromosomu aberācijas in vitro ģenerētos embrijos, kas paredzēti implantēšanai. Tā ir citoģenētiska pārbaude, kurā var noteikt tikai noteiktu hromosomu skaitliskās aberācijas. Tādējādi aneuploidijas skrīnings ir pirmsimplantācijas diagnozes (PGD) forma.
Kas ir aneuploidy skrīnings?
Terminu aneuploidy screening izmanto, lai apkopotu citoģenētiskās izmeklēšanas metodes, kas var sniegt norādes par skaitliskajām aberācijām noteiktos hromosomos in vitro apaugļošanā (IVF). Principā aneuploidijas skrīnings var sniegt norādes par nullosomy, monosomy un polysomy, piemēram, B. dod trisomiju.
Nullosomijā pilnīgi trūkst hromosomu pāra, monosomijā trūkst vienas hromosomu pāra homologās hromosomas, un polisomijā konkrētam hromosomu pārim ir vairāk nekā divas homoloģiskas hromosomas. Visslavenākā polisomija ir 21. trisomija, kas noved pie Dauna sindroma. Tā kā vairums skaitlisko hromosomu aberāciju - īpaši monosomijas - ir nāvējošas, t.i., noved pie dabiskām izbeigšanām, abortiem vai nedzīvi dzimušiem dzīvniekiem, dzemdē tiek implantēti tikai embriji bez atpazīstamām hromosomu aberācijām.
Tam vajadzētu uzlabot IVF panākumu līmeni, taču noteiktas hromosomu aberācijas ne vienmēr ir letālas, bet gan noved pie novirzēm un nopietniem ierobežojumiem vēlākā dzīvē, piemēram, Dauna vai Tērnera sindromā. Tāpēc ētisku apsvērumu dēļ dažās valstīs ir vispārējs aizliegums vai stingri ierobežojumi šāda veida diagnozei pirms implantācijas (PGD).
Funkcija, efekts un mērķi
Aneuploidijas skrīningu izmanto tikai in vitro apaugļošanai. Vissvarīgākais mērķis ir tikai embrijus nodot dzemdē bez atpazīstamām hromosomu aberācijām dzemdē, lai iegūtu pēc iespējas lielākas iespējas gūt panākumus grūtniecības laikā ar mākslīgo apaugļošanu. Principā var nošķirt divas polārā ķermeņa diagnostikas metodes un pirmsimplantācijas embrija pārbaudi. Pirmā metode ietver olšūnas, kas vēl nav apaugļotas, polāros ķermeņus.
Šeit tiek pārbaudīta tikai iespējamā olšūnas aneuploidija. Tas tiek darīts, pieņemot, ka aptuveni 90% aneuploidiju ir mātes izcelsme. Tāpēc tas nav PGD šaurākā izpratnē, bet gan auglības diagnoze, jo nav notikusi apaugļošana, t.i., olšūnas saplūšana ar spermas šūnu. Savukārt aneuploidijas skrīnings pirmsimplantācijas embrijam blastulas agrīnā stadijā tiek kvalificēts kā PGD, jo izmeklēšana attiecas uz “īsto” embrionālās stadiju - pat ja tā ir ļoti agrīna stadija, tikai dažas dienas veca.
Polārā ķermeņa diagnostikā divi polārie ķermeņi, kurus olšūna veido pirmajā un otrajā meiozes laikā, pirms tā saplūst ar spermas šūnu, tiek noņemti un pārbaudīti, vai nav aneuploidijas. Tā saukto FISH testu (fluorescences in situ hibridizācija) izmanto, lai noteiktu jebkādu iespējamo aneuploidiju. Līdz šim FISH tests ļāva pārbaudīt tikai 13., 16., 18., 21., 22. hromosomu un dzimuma hromosomas X un Y. Divkāršās spirāles struktūras hromosomas, kas sadalītas pēc mejozes, savienojas ar atbilstošo papildinošo DNS secību, izmantojot hromosomām specifiskas DNS zondes.
DNS zondes ir apzīmētas ar dažādām fluorescējošām krāsām. Homologās hromosomas var saskaitīt ar gaismas mikroskopu pusautomātiskā procesā, lai varētu identificēt skaitliskās aberācijas. Analoģiski ķermeņa polārajai diagnozei tiek veikta aneuploidijas skrīnings embrijiem pirms implantācijas, kuri joprojām atrodas blastomēra agrīnā stadijā. Tomēr tagad mums ir darīšana ar hromosomu diploīdiem kopumiem, kuru dubultā spirāle vispirms ir jāsadala, lai sāktu hromosomu savienojumu ar komplementārām DNS zondēm.
Aeuploidijas skrīninga mērķis abās metodēs joprojām ir pozitīva in vitro apaugļotas olšūnas atlase pirms tās pārvietošanas uz dzemdi, lai sasniegtu visaugstāko iespējamo panākumu līmeni vēlamajā grūtniecības laikā. Daudz apspriesta ētiska problēma rodas no negatīvās atlases, kas automātiski tiek saistīta ar pozitīvo atlasi un kuras daži galēji kritiķi vēlas izmantot argumentus, lai to pietuvinātu eitanāzijai. Vēl viena ētiska problēma ir novērojama, lietojot IVF tā sauktā glābšanas mazuļa ģenerēšanai. In vitro ģenerētu embriju pozitīvu izlasi var izmantot, lai kultivētu visvarenās imūnkompatibilās cilmes šūnas, kas ar implantācijas palīdzību varētu glābt brāļu un māsu dzīvības, kurām ir noteiktas slimības.
Riski, blakusparādības un briesmas
Pati aneuploidijas pārbaude, kā arī pētāmo šūnu kodolu ekstrakcija notiek ārpus ķermeņa, un tāpēc tā nav saistīta ar tiešiem riskiem vai briesmām veselībai, un tāpēc tai nav blakusparādību. Faktiskie riski un briesmas ir tajā, ka anoiploidijas skrīninga ieguvums blastomēros, t.i., pirmsimplantācijas embrijos, lai palielinātu veiksmes līmeni attiecībā uz vēlamo grūtniecību, vēl nav sasniegts.
Parasti sistēmiskas problēmas rodas pārspīlētu cerību uz skrīninga rezultātu precizitāti dēļ. Tas attiecas gan uz pozitīvu, gan uz negatīvu rezultātu. Pozitīvs rezultāts, t.i., vismaz viena hromosomu aberācija tika konstatēta, ir saistīta ar noteiktu nenoteiktību. Var gadīties, ka pozitīvs rezultāts nepareizi izslēdz attiecīgās olšūnas transplantāciju, lai gan patiesībā hromosomu defektu nav. Šāda veida kļūdaina diagnoze ir mazāk saistīta ar pašu procedūru, nevis ar to, ka embrijiem blastulas stadijā var būt dažas šūnas ar hromosomu aberācijām.
No otras puses, potenciālie IVF bērna vecāki nedrīkst būt pārliecināti, ka, ja aneuploidijas tests ir negatīvs, patiesībā nav hromosomu aberācijas. Vēl viena briesmas rodas, ja no embrija tiek noņemts nepieciešamais šūnu skaits. Gadās, ka šūnas, kas ņemtas biopsijas rezultātā, mirst un vairs nevar tikt pārbaudītas. Tā kā biopsiju vairs nevar atkārtot uz tā paša embrija, tā vairs nav pieejama transplantācijai, jo nav testa rezultātu. Tiek arī diskutēts par to, cik lielā mērā biopsija ietekmē embrija auglību, lai ietekmētu kopējo grūtniecības panākumu līmeni.
.jpg)
